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甲基绿-派洛宁染色液经过改良，不含甲醇，在组织或细胞染色中对细胞核进行染色，其中的甲基绿经过提纯，更容易着色，该染色液也可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用，10mL染色液可以染色20个样本。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

甲基绿-派洛宁染色液是一种把细胞核染成绿色或蓝绿色，把细胞浆和细胞核中的核仁染成红色或红紫色的染色液。甲基绿和细胞核中的DNA结合，从而使细胞核染成绿色或蓝绿色，派洛宁可以和细胞浆或核仁中的RNA结合，从而使细胞浆和核仁染成红色或红紫色。

• 滤纸、RNase(可选)
  
• 系列乙醇、蒸馏水、丁三醇、丙酮或正戊醇
  
• 4%多聚甲醛、Carnoy固定液或10%中性福尔马林、二甲苯或环保脱蜡透明液

• 首次使用染色液时建议先取1～2个样品做预实验。
  
• 甲基绿-派洛宁染色液染色可以根据染色结果和要求调整时间。
  
• 有些粘液细胞有可能被派洛宁染成红色，应注意区分。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 石蜡切片染色
  
  • 组织入Carnoy固定液或10%中性福尔马林，固定3～5h。
    
  • 切片5μm，常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水，蒸馏水稍洗。
    
  • 入甲基绿-派络宁染色液，室温浸染30～60min。
    
  • 取出切片，用滤纸稍微吸干切片周围染色液。
    
  • 用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)冲洗3次，每次2～3min。
    
  • 二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固。
• 冰冻切片染色
  
  • 蒸馏水冲洗2min。
    
  • 切片入甲基绿-派络宁染色液，室温浸染25～50min。
    
  • 用蒸馏水冲洗2次，此时样本呈蓝色。
    
  • 用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)冲洗3次，每次2～3min。
    
  • 二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固。
• 细胞染色
  
  • 用4%多聚甲醛固定10min以上。
    
  • 蒸馏水洗涤2min。
    
  • 换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。
    
  • 用甲基绿-派络宁染色液染色5～10min。
    
  • 显微镜下观察。
• 荧光染色
  
  • 如果进行免疫荧光染色，在染色后应70％乙醇洗涤2次，每次2min。
    
  • 95%乙醇脱水2min。
    
  • PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。
    
  • 进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

• 取另外一张连续切片入RNase(1mg/mL)，37℃恒温箱内孵育3h，蒸馏水冲洗干净。
  
• 入甲基绿-派络宁染色液染色，余下步骤同上。RNA染色结果为阴性。